Пцр анализ — что это такое, норма, расшифровка

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Результаты ПЦР и особенности их расшифровки интересуют многих людей, чьим диагнозом является подозрение на ЗППП.

Как отмечают доктора, метод обладает высокой результативностью и минимальным процентом ошибок. Поэтому зачастую используется как контрольный в диагностике инфекционных процессов.

В чем состоит суть ПЦР методики, хотят знать больные люди, и благодаря чему обеспечивается высокая вероятность получения верных результатов. Как расшифровываются полученные итоги, и есть ли связь между этим методом и другими способами диагностики?
ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Суть метода ПЦР

ПЦР-методика – исследование, используемое довольно широко в современном мире. Диагностика позволяет поставить диагноз не только при инфекционных процессах, но и при генетических патологиях, некоторых онкологических недугах. Изначально ПЦР изобреталась не для применения в медицине.

В отрасль здравоохранения метод пришел из области молекулярной биологии, в которой активно использовался после своего открытия. Ученый, создавший ПЦР, получил нобелевскую премию.

Прежде чем разбираться, как расшифровывать результаты анализов ПЦР, необходимо понять, в чем основная суть методики.

На самом деле на словах все выглядит довольно просто. У пациента берется биологический материал. Затем он обрабатывается особым образом с помощью специальных химических реагентов.

Затем получившуюся смесь помещают в особую машину, которая проводит процесс амплификации.ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка То есть многократного умножения определенных фрагментов ДНК или РНК, что удалось выявить с помощью добавления реагентов.

Когда процесс амплификации подойдет к концу, доктору остается только идентифицировать полученные результаты, чтобы поставить верный диагноз.

Главное – проявить внимательность на этапе идентификации. Но учитывая, что сегодня большую часть работы делает компьютер, все сильно упрощается.

ПЦР отличается высокой эффективностью. Ее широко применяют для того, чтобы определять наличие в организме скрытых инфекционных процессов, которые не дают положительных серологических реакций. Также скрытые инфекции обычно нельзя выявить с помощью посева или микроскопии. Поэтому зачастую ПЦР – единственный достоверный способ постановки диагноза в этом случае.

Какие материалы можно использовать для ПЦР

Часто удачность исследования зависит от того, как и какой материал брался для выполнения анализа. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода.

В качестве материала могут служить:

  • кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе
  • мокрота, собираемая при откашливании
  • налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы
  • мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций
  • исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов
  • ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкабиоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др.

Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека.

При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель. Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости.

Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания.

Что значит положительный результат ПЦР

ПЦР – метод, который может похвастаться своей высокой специфичностью.

Предположим, доктор поставил себе цель обнаружить какой-то патогенный микроорганизм в теле пациента. И если тот на самом деле присутствует в теле, он будет обнаружен. При этом спутать его с каким-либо другим патогеном благодаря уникальному коду ДНК будет невозможно.

Если ПЦР положительный, значит, в организме с вероятностью почти в 100% находится возбудитель, поиск которого проводился врачом. Ведь методика рассчитана, в отличие от многих других диагностических методов, именно на поиск самих возбудителей, а не их следов.

Как отмечают доктора, при данном исследовании вероятность случайно принять один возбудитель за другой сводится к нулю. Зато существует вероятность получения положительных результатов после терапии.

Если в организме будут оставаться обломки нуклеиновых кислот. Однозначно положительной реакция чаще всего бывает, если пациент предъявляет жалобы на какие-то конкретные симптомы инфекционного процесса. Причем результат будет сохраняться даже в течение нескольких месяцев после того, как возбудитель будет полностью побежден и удален из организма.

Что значит отрицательный результат ПЦР

Если ПЦР результат отрицательный, значительное число пациентов автоматически считают, что они здоровы.ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка Это практически правильное решение.

Ведь если итоги оказались отрицательными, значит фрагменты патогенного микроорганизма не были определены тест-системой. Из этого следует логичный вывод, что микроорганизма в теле нет.

Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени.

Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии. Чтобы на 100% быть уверенным в своем здоровье, пройти исследование повторно рекомендуется через несколько недель, а порой и месяцев.

Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР

Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования.

В первую очередь необходимо запомнить, что доверять результаты стоит тому же медицинскому работнику, что первоначально давал направление на исследование.ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка Связана эта рекомендация с тем, что в этом случае доктор будет представлять себе, что он ожидает увидеть в анализах. Сможет грамотно интерпретировать итоги, соотнося их с клинической картиной.

Получить направление наиболее часто можно от уролога, гинеколога или венеролога. Соответственно, после получения итогов относить бланк с результатами стоит кому-то из них. Важно помнить, что ПЦР – довольно дорогой метод диагностики. Его не принято использовать просто так, без специальных показаний к обследованию.

Среди них:

  • появление специфических для ЗППП симптомов
  • обследование перед планированием беременности или процедурой искусственного оплодотворения
  • поиск причин бесплодия и другие показания

Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения

Часто пациенты задают на приеме у медицинского работника вопрос о том, когда результаты ПЦР крови и мазков становятся положительными после заражения. Все зависит от того, насколько быстро конкретная инфекция сможет, размножаясь, пройти пороговую для теста концентрацию в материале.

Преимуществом ПЦР является то, что порог чувствительности у теста довольно низкий.

Это значит, что выявить признаки заражения можно даже в том случае, если количество возбудителя в биологическом материале будет минимальным.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Подобная особенность дает возможность постановки диагноза даже в период инкубации, когда симптомы еще полностью отсутствуют.

Однако осечка возможна и при применении ПЦР методики. Это происходит, например, если пороговая концентрация все же не успела достичь определяемых тестом значений. В этом случае велика вероятность получения далеких от правды результатов.

Вид бланка анализов на ПЦР

Вопрос о том, как выглядит бланк результатов анализов ПЦР, весьма актуален.

Как отмечают доктора, ничего сложного во внешнем виде бумаги нет. Зачастую на документе можно обнаружить название искомого возбудителя. А напротив него пометку «обнаружен» или «не обнаружен».

В первом случае пациенту рекомендуется озаботиться собственным здоровьем. Так как анализ расценивается как положительный, а человек, как зараженный. Следовательно, ему требуется терапия.

Во втором случае чаще всего состояние пациента оценивают, как здоровое, хотя могут быть и исключения. Важно помнить, что количество возбудителей, указанных на бланке, зависит во многом от того, какое конкретно вид анализа применялся.

Если проводился поиск только одного патогенного микроорганизма, в результате будет фигурировать только его название с соответствующей пометкой. Если ПЦР проводилось сразу на несколько инфекций, что тоже возможно, в бланке будет список патологий с пометками.

Сегодня в лабораториях при комплексном анализе на группу инфекций не принято выдавать на каждый патогенный микроорганизм отдельный бланк. Их все указывают на одном листе.

Вероятность ошибочных итогов при ПЦР

Часто пациенты интересуются вопросом о том, возможно ли получение ложных результатов обследования при использовании методики. К сожалению, как отмечают врачи, ошибки хоть и редко, но случаются.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Существует, например, вероятность получить ложноположительные результаты ПЦР сразу после лечения. Объясняется это очень просто.

Терапия уже окончена, возбудитель удален из организма и не может заражать новые ткани. Однако остатки ДНК или РНК еще могут циркулировать в крови или ином диагностическом материале. В этом случае тест-система будет улавливать их и воспринимать за полноценную патологию, выдавая ложноположительный итог.

Именно поэтому рекомендуется после терапии сдавать исследование несколько раз с разными промежутками времени. Только в этом случае итоги будут достаточно объективными.

Ложноотрицательные результаты анализов ПЦР после приема антибиотиков также возможны. Происходит это в том случае, если пациент, неверно используя препараты антибактериального ряда, смазал симптомы болезни.

Не позволил микроорганизму активно размножаться в теле, но при этом и не довел его уничтожение до конца. В этом случае количество возбудителей может упасть ниже пороговой концентрации чувствительности. Это и даст неверные результаты тестирования.

Связь ПЦР с другими методиками

С помощью метода ПЦР доктора нередко подтверждают или, напротив, опровергают результаты других методов обследования, используемых для диагностики ИППП.

Например, с этой целью может использоваться ИФА.ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Бывает так, что ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Тогда больной оказывается в замешательстве относительно своего состояния.

Читайте также:  Анализ на токсоплазмоз - норма, расшифрлвка

Доктора рекомендуют не теряться, а сначала провести оба теста повторно. Если ИФА останется положительным, а ПЦР отрицательным, с большой вероятностью заболевание в организме пациента отсутствует.

Ведь иммуноферментный анализ направлен на реакцию антиген-антитело. И порой может принимать сходные по структуре антигены других возбудителей за искомый, выдавая ложноположительные результаты.

Вероятность того, что ИФА дало верный результате на второй раз, а ПЦР, напротив, выдало ошибку, например, из-за низкого титра возбудителя, сведена к минимуму. Это скорее казуистика, чем реальная клиническая практика.

Результаты ПЦР диагностики обладают высокой ценностью в диагностике большого количества различных патологий. В первую очередь методика является незаменимой при подозрении на различные ЗППП.

Если вам нужно сдать получить комментарии по результатам ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: https://onvenerolog.ru/zppp/rezultaty-pcr.html

Пцр анализ — что это такое, расшифровка диагностики инфекционных заболеваний

Методика ПЦР – популярная диагностика вирусов и бактерий, которая в основе своего исследования берет принципы и научную базу молекулярной биологии.

У каждого вируса/бактерии есть ДНК, маленькие фрагменты которого и выявляет анализ ПЦР с помощью определенного генетического детектора. Биоматериал для ПЦР исследования берется с кожи, слизистых, крови, слюны, мочи и т.д.

Эта методика не раз доказала свою эффективность и сверхчувствительность к различным видам возбудителей поэтому многие врачи часто назначают пациентам такие анализы.

Пцр исследование: что это такое? в чем преимущества и недостатки?

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаПЦР сейчас повсеместно используют в медицинских клиниках для точного диагностирования вирусов и бактерий. Точное расшифровка названия ПЦР — это полимеразная цепная реакция, которая способна выявлять даже единичные бактерии и вирусы, то есть в очень малых концентрациях.

ПЦР исследует всего лишь ДНК вируса и искусственно увеличивает его генетическую информацию методом копирования, используя специальные реагенты, ферменты для каждого вируса и инфекции. Обнаружение чужеродных, нехарактерных участков ДНК- пробы указывает на наличие инфекции.

Данная методика быстро и в кротчайшие сроки обнаруживает возбудителя и это значительно уменьшает время и ресурсы врача для постановки диагноза. Исследование проводится буквально 1-2 рабочих дня, чтобы точно ответить на вопрос о наличии или отсутствии инфекционного агента.

Таким образом, главное преимущество анализа – это его быстрота, универсальность и высокая чувствительность. Но, однако, нередко пациенты жалуются, что результаты ПЦР-исследования получаются ложноположительными или ложноотрицательными, что подрывает доверие людей к этому анализу.

Однако, дело не в самой методике, которая признана точной и эффективной, а в ряде человеческих и профессиональных факторов, среди которых нужно выделить:

  • Игнорирование пациентом требований врача или правил подготовки к исследованию;
  • Непрофессионализм врача;
  • Недостаточная квалификация медицинского работника (медсестра);
  • Дешевые реагенты лаборатории;
  • Несоблюдение стандартов тест-систем лабораториями.

Перед сдачей анализа пациентом должны быть соблюдены определенные требования, чтобы не получить ложноотрицательные результаты.

К тому же нередко непрофессиональные врачи или недостаточно квалифицированные работники берут биоматериал не из того участка слизистой или кожи, что приводит к грубым ошибкам исследования.

А дешевые или некачественные реагенты – это проблема любого анализа, приводящая к искажению результатов.

Вирусы способны к мутациям, а человеческий иммунитет не успевает реагировать на изменения.

Наглядно это можно представить по вирусу гриппа, поэтому нередко пациенты сталкиваются с противоположными результатами, сделанными в разных лабораториях.

Это происходит только по причине несоблюдения стандартов используемых тест-систем при проведении анализа, которые должны реагировать на мутацию.

Диагностика методом ПЦР: что выявляет и диагностирует

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаКак правило, данное исследование ассоциируется с диагностикой инфекций урогенитального тракта, но возможности ПЦР позволяют выявлять куда более широкий спектр заболеваний. В лаборатории могут взять анализ крови, спинномозговой жидкости, а также отделяемого из слизистой зева, носоглотки, ушей, влагалища, цервикального канала, уретры и других участков.

Таким методом можно исследовать абсолютно любой пригодный биоматериал. В этом его главное преимущество в отличии от серологических (выявление антител) и культурологических исследований (посевы). Чаще всего методику ПЦР используют, чтобы диагностировать половые инфекции, такие как:

  • Хламидии (хламидиоз);
  • Трихомонады (трихомониаз);
  • Гонококки (гонорея);
  • Гарднереллы (гарднереллез);
  • Уреаплазмы (уреаплазмоз);
  • Микоплазмы (микоплазмоз)
  • Грибы Candida (кандидоз);
  • Цитомегаловирус;
  • Вирус герпеса 1 и 2 типа (генитальный герпес);
  • Вирус папилломы человека;
  • Другие инфекции.

Методика ПЦР является «золотым стандартом» диагностики выше указанных заболеваний и инфекций.

Обычный мазок на флору не способен точно выявить половые инфекции, как и другие анализы. В основном, врач или медсестра берет мазок содержимого из цервикального канала, влагалища у женщин и из уретры — у мужчин.

Кроме того, в сыворотке крови методом ПЦР могут обнаружить вирусы гепатита всех видов, Эпштейн Барра, туберкулеза, герпеса всех типов, ВИЧ, бактерию Helicobacter pylori, грипп, токсоплазмоз и другие инфекции. В лаборатории осуществляют обычный забор крови из вены, который везется на исследование. ПЦР можно делать как качественным методом, так и количественным. Во втором случае с точностью подсчитывается количество вируса или инфекции в пробе. Это называется в медицине «вирусная нагрузка», которая позволяет определить степень выраженности инфицирования и самого заболевания.

Примером количественного исследования ПЦР является так называемый анализ «Фемофлор«. Благодаря ему определяют состояние микрофлоры урогенитального тракта и наличие возбудителей половых, анаэробных инфекций, рассчитывают общую бактериальную массу и т.д. Далее лаборанты занимаются их количественным подсчетом, составляют графики.

Данный анализ используют для широкой диагностики половых, неспецифических инфекций и биоценоза урогенитального тракта. К тому же количественными методами определяют вирусы гепатита, ВПЧ разных типов, мононуклеоза и других заболеваний. К примеру, вирус гепатита C нельзя достоверно определить иначе, чем методикой ПЦР.

Как берут анализ?

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Медицинские работники попросту делают соскоб или мазок не того биологического материала поэтому на такой, казалось бы, незначительный нюанс следует обратить внимание. Содержимое помещают в искусственную среду для исследования и везут в лабораторию. Сам анализ проводится достаточно быстро и уже на следующий день пациент может забрать результаты. Лаборатории, как правило, предупреждают о всех возможных задержках и нарушениях сроков, так как нередко исследование пробы попадает на нерабочий или праздничный день.

Расшифровка результатов ПЦР

Расшифровка результатов не представляет трудностей даже для рядового пациента, так как, это действительно несложно.

Возбудитель либо обнаружен, либо нет, если это качественное исследование, которое не предполагает никаких числовых показателей. Трактовка обнаруженных показателей одинаковая что у мужчин, что и у женщин.

В результате анализов ПЦР так и указывается: обнаружено (положительно) или не обнаружено (отрицательно).

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаЕсли ничего не обнаружено, то значит это норма и пациент здоров либо получился ложноотрицательный результат, а особенно об этом свидетельствует тот факт, когда у человека ярко выраженная симптоматика. Чаще всего так происходит с половыми инфекциями, так как исследование требует серьезной подготовки. Перед анализом нельзя мочиться хотя бы 2 часа, заниматься спринцеванием, а женщинам нужно ждать окончание менструации и не вставлять вагинальные свечи перед исследованием.

Кровь нужно сдавать натощак, а остальные исследования не требуют специальной подготовки. В ином случае результаты получатся ошибочными, а врач не сможет диагностировать заболевание и понять, как лечить пациента.

Если в анализе написано «обнаружено», то это точно говорит о наличии инфекции и о сопутствующем возбудителю заболевании. В норме инфекции и вирусы должны отсутствовать.

Как правило, если выявлен возбудитель, то проводится его чувствительность к спектру антибактериальных препаратов и это дополнительно отражается в самих результатах анализа. Однако, бывают и такие случаи, когда пациент прошел курс лечения, и инфекция опять обнаруживается в анализах ПЦР.

На самом деле в этом ничего удивительного, так как мертвые клетки вируса какое-то время еще сохраняются поэтому пересдавать анализ нужно через 2 недели после лечения.

 Ложноположительные результаты чаще всего указывают на ошибки лаборантов. Расшифровка количественного исследования ПЦР уже немного сложнее.

В таком случае нужно смотреть на референсные значения лаборатории и читать пояснения к показателям.

В анализах, как правило, указаны такие результаты: «не обнаружено», «меньше порогового титра» «титр, выходящий за пределы порогового значения», «очень высокие титры».

 В норме ничего не должно быть обнаружено или на крайний случай результат должен быть меньше порогового значения, что говорит о «стертой» клинике и указывает на перенесенную в прошлом инфекцию, а все остальные повышенные показатели являются патологией.

Трактовка результатов ПЦР у женщин

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаРасшифровка результатов ПЦР, не связанных с гинекологией и урологией, является одинаковой для обоих полов, но в ином случае есть своя специфика. Обнаружение у женщины половой инфекции указывает на урогенитальное заболевание, которое может поразить уретру, органы малого таза, мочевой пузырь и почки. Как следствие, у женщины могут наблюдаться сопутствующие заболевания: пиелонефрит, цистит, уретрит, аднексит и т.д. Все зависит от клинической симптоматики и результатов других анализов.

Еще одной опасностью является обнаружение инфекции во время беременности женщины, так как существует большой риск инфицирования плода. Ребенок может заразиться во время беременности или проходя через родовые пути.

Это грозит ему серьезными последствиями и болезнями. Самые опасный период — заражение в первом триместре беременности.

Обнаружение инфекции требует лечения, а в некоторых случаях и прерывание беременности поэтому диагностику ПЦР лучше делать до планирования ребенка.

Трактовка результатов ПЦР у мужчин

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаОбнаружение половой инфекции у мужчин указывает на специфический уретрит, простатит, вызванный возбудителями. Анализ ПЦР берут соскобом из уретры, где обычно и оседают все «инфекционные агенты». Они также могут попасть в соседние органы, вызывая другие заболевания и неприятные состояния. Например, скрытое течение болезни хламидиоза может привести к возникновению так называемого синдрома Рейтера, поражающего суставы и иммунную систему.

Обнаруженные инфекции требуют лечения, так как для мужчин тоже крайне опасны последствия не долеченной болезни.

Читайте также:  Ph в анализе мочи - норма и отклонения

Метод ПЦР способен выявить инфекцию, даже если пациент не чувствует никаких симптомов, но у мужчин, как правило, симптомы сразу дают о себе знать.

В таком случае нужно обязательно обратиться к врачу или самостоятельно прийти в частную клинику. Тем более, особо важно проходить ПЦР — диагностику обоим партнерам при планировании беременности.

Стоимость анализа

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаАнализы ПЦР можно сдать сейчас в каждой частной лаборатории. Все зависит от того, что пациенту собираются диагностировать. Если нужно сдать анализ на половые инфекции, то один показатель стоит примерно 300-400 рублей, но, как правило, в прейскуранте медицинской организации предусмотрена возможность сделать комплексное исследование, куда будут включены сразу несколько видов показателей половых инфекций.

Количество таких возбудителей будет разным: 6, 11, 17 и т.д. Цены, соответственно будут варьироваться от 1300 до 6000 рублей.

Если сдавать кровь методом ПЦР на выявление различных инфекций, то цены будут абсолютно разными: от 300 рублей до 17000 рублей.

 Один из самых дорогих анализов ПЦР – это диагностика гепатита С, так как данный анализ требует проведения очень многих дополнительных тестов. Количественные методы ПЦР, как правило, значительно дороже качественных.

Цены на отделяемое из носа, зёва и других органов будут примерно от 350 рублей до 5000 рублей. Пациент может еще и дополнительно оплатить услуги забора крови/ мазка/соскоба, а их стоимость будет примерно 150-350 рублей. Таким образом, ценовая политика зависит от предполагаемого диагноза, а сказать среднюю стоимость анализа ПЦР достаточно сложно.

В заключении можно сказать, что анализы ПЦР, несмотря на незначительные недостатки, обладают 100% точностью и специфичностью. Врачи часто прибегают к данной методике исследования, чтобы выявить любых опасных и скрытых возбудителей, которые являются причиной множества заболеваний.

А тем более без анализов ПЦР не всегда можно точно установить диагноз, так как другие исследования в силу своей специфики не способны выявить определенных инфекционных агентов.

Анализы ПЦР на сегодняшний день практически заменяют другие методы лабораторной диагностики, которые менее точны и специфичны. Быстрота исследования позволяет оперативно выявить заболевание.

Но, тем не менее, их стоимость все же немаленькая, а государственные поликлиники могут сделать такие анализы бесплатно за счет полиса ОМС только по острой необходимости, но не в случае обычной профилактики или подозрений.

загрузка…

Источник: http://MedicKon.com/analizyi/obshhie/ptsr-analiz-diagnostika-chto-eto-takoe-rasshifrovka.html

Анализ крови на ПЦР – что это такое, суть метода, показания к назначению, расшифровка анализа крови ПЦР

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Диагностика инфекционных заболеваний – бактериальных и вирусных – направлена на раннее выявление возбудителей, что позволяет назначать раннюю и максимально эффективную терапию. Самым современным способом диагностики инфекций является ПЦР или полимеразная цепная реакция. Так что же это за метод, и для чего он нужен?

Суть полимеразной реакции

Любой микроорганизм и вирус содержат в своей структуре молекулы ДНК или РНК. У каждого из них эти соединения уникальны, поэтому, если выделить в анализе крови у детей или взрослых нуклеиновые кислоты, можно с абсолютной точностью поставить диагноз.

К сожалению, концентрация ДНК в образцах крови или других биологических материалах достаточно низка и с помощью обычных методов диагностики определить ее не получается. Чтобы справиться с этой проблемой, была изобретена полимеразная цепная реакция.

Сущность ПЦР заключается в специальной обработке образца крови, в результате чего в ней увеличивается концентрация ДНК молекул, определение типа которых в дальнейшем позволяет установить вид возбудителя и поставить диагноз.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Как сдать кровь на ПЦР

При подготовке к анализу следует придерживаться общих рекомендаций: не пить и не есть непосредственно перед анализом крови. Хотя для сдачи крови на ПЦР можно так строго не придерживаться этих требований, так как точность исследования не зависит от того, на сытый или голодный желудок был взят анализ.

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР

С помощью ПЦР можно выявить практически любые вирусные и бактериальные заболевания.

Для анализа используется не только кровь, но и другие биологические материалы: сперма, слюна, мазки из уретры и с шейки матки.

Анализ крови будет информативен в том случае, если возбудитель конкретного заболевания проникает в кровь человека. Поэтому ПЦР крови назначают при следующих заболеваниях:

  • вирусные гепатиты А, В, С, D и TT;
  • цитомегаловирус;
  • герпетическая инфекция (вирусы герпеса 1, 2 и 4-го типов);
  • ВИЧ-инфекция
  • энтеровирусная инфекция;
  • опоясывающий лишай;
  • краснуха;
  • токсоплазмоз;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • листериоз.

Если же взять во внимание возможность проведения ПЦР других биоматериалов, то в список заболеваний, выявляемых с помощью ПЦР, следует добавить:

Особо актуально в настоящее время ПЦР анализа крови беременной на так называемые TORCH-инфекции: цитомегаловирус, токсоплазмоз, краснуху и герпесвирусную инфекцию. Связано это с тем, что упомянутые заболевания могут привести к аномалиям развития плода.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Преимущества ПЦР

  1. ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка100% точность диагностики – если в крови есть даже несколько фрагментов ДНК возбудителя, с помощью ПЦР они буду выявлены, и будет поставлен точный диагноз. Это главное отличие данного метода от других способов диагностики – ИФА, общего анализа крови и прочих.
  2. Специфичность. При проведении ПЦР отсутствует такое понятие, как ложноположительный или ложноотрицательный результат. В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА).
  3. Возможность проведения анализа сразу на несколько возбудителей из одного образца биоматериала, что делает метод удобным для пациента – не нужно несколько раз сдавать анализ.
  4. Быстрота. Не нужно выделять и выращивать возбудителя на питательных средах, как это делается при бактериологическом исследовании. Результат может быть готов уже в день сдачи анализа.
  5. С помощью ПЦР выявляют возбудителей латентных заболеваний, когда возбудитель в организме есть, но он еще не вызвал заболевание, или когда пациент является носителем инфекции (гепатита или ВИЧ).
  6. Низкая стоимость. Цена анализа ПЦР на одного возбудителя составляет 250-500 рублей. Чуть дороже стоит полуколичественный анализ на вирусы – около 1000 рублей.

Недостатки анализа

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровкаПЦР является высокотехнологичным методом исследованием и предъявляет высокие требования к оснащению лаборатории. Помещение, где делают анализ, обязательно должно быть оснащено фильтром биологической очистки, так как в воздухе постоянно присутствуют частицы кожи, слюны, содержащие в своем составе молекулы ДНК. Несоблюдение техники работы с биоматериалами может стать причиной неверного результата.

Анализ крови – расшифровка у взрослых (ПЦР)

Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы:

  • отрицательный результат – возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен;
  • положительный результат – в организме имеется возбудитель указанного заболевания.

Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых.

Кому нужно сдать анализ на ПЦР

Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем (хламидиоз, гарднереллез, ВИЧ-инфекция).

При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. В обязательном порядке кровь на TORCH-комплекс сдают беременные женщины.

А также женщины, только планирующие беременность.

Хотя ПЦР является максимально эффективным методом диагностики, зацикливаться только на нем не стоит. Обследование пациента при любом заболеваний должно носить комплексный подход.

Если цепная полимеразная реакция позволяет выявить возбудителя, то серологическое исследование позволяет оценить эффективность лечения, реакцию организма на возбудителя и лекарства.

Назначать все исследования должен врач по показаниям.

Увидеть, как выполняется анализ крови ПЦР,  вы сможете, просмотрев данный видео-обзор:

Гудков Роман, врач-реаниматолог

Источник: https://okeydoc.ru/chto-takoe-analiz-krovi-na-pcr-i-zachem-on-nuzhen/

Пцр анализ, что это такое? расшифровка и описание

Впервые об анализе методом ПЦР заговорили в 1983 году. Данная методика была разработана Кэри Мюллисом и сотрудниками его лаборатории. С тех пор популярность исследования неуклонно возрастает, т.к. оно обладает существенным рядом преимуществ перед другими методиками.

На сегодняшний день ПЦР диагностика является эталоном или стандартом в выявлении инфекций и возбудителей заболеваний, особенно протекающих бессимптомно. В первую очередь это доклиническая диагностика.

Пцр анализ, что это такое?

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Проведение анализа в ПЦР машине

Сущность ПЦР анализа заключается в том, что в пробирке клонируются (многократно увеличиваются) последовательности нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), характерных для определенного вида возбудителей.

Аббревиатура ПЦР расшифровывается как — полимеразно цепная реакция.

Главная отличительная черта данного метода – это амплификация, т.е. создание огромного числа копий необходимого гена или его фрагмента. Все это производится вне организма, т.е. в пробирке.

Так, если проведено 20 циклов ПЦР, то получается примерно 1 миллион копий и более. Это позволяет обнаружить инфекцию даже при её незначительном количестве в исходном материале, когда другие методы анализа бессильны. Это определяет высокую чувствительность данного метода.

Простыми словами можно провести такую аналогию — одну маленькую песчинку на полу вы не заметите, но после увеличения количества песчинок в миллион раз (проведение ПЦР), кучка песка уже будет хорошо видна.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Основными преимуществами анализа на инфекции ПЦР-методом являются:

  • наиболее высокая чувствительность и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов;
  • возможность выявления микроорганизмов в разнообразных биологических материалах (кровь, моча, влагалищный секрет, слюна и т.д.);
  • возможность выявить одновременно несколько причинных микроорганизмов, если таковое наблюдается. Для сравнения — использование бактериологических методов не дает такой возможности, т.к. необходимо применение различных сред для выращивания различных болезнетворных микробов;
  • возможность транспортировки биологического материала, т.к. для выявления возбудителя не обязательно сохранять его в живом виде;
  • скоростьвыполнения анализа;
  • точность проводимой этиологической диагностики;
  • возможность количественного определения возбудителей — особенно актуально для условно-патогенных микробов, которые только по достижении определенной концентрации способны вызывать заболевание;
  • способность контролировать течение инфекционного процесса при проведении лечения.
Читайте также:  На каком сроке показывает тест на беременность?

Анализ ПЦР на инфекции

В настоящее время методом полимерзной цепной реакции определяют большинство половых (и других) инфекционных заболеваний. Диагностика получила широкое распространение за счет своей высокой чувствительности и специфичности.

Особенно большой популярностью пользуется анализ ПЦР на хламидии.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

ПЦР-диагностика позволяет выявлять даже минимальное количество хламидий, которые, как правило, еще не приводят к появлению клинических симптомов. Даже наличие только 2 молекул нуклеиновых кислот в исследуемом материале позволяет выявить причинную инфекцию.

А это залог успешного лечения, которое начинается еще на доклиническом этапе.

Также производится определение инфекций:

  • ВИЧ;
  • вирусные гепатиты;
  • туберкулез;
  • клещевой энцефалит;
  • различные венерические заболевания и т.д.

ПЦР-диагностика позволяет решать и ряд других важных задач:

  • мониторинг терапии и оценка ее эффективности;
  • определение «нагрузки вирусами», на основании которой производится индивидуальный подбор дозы препарата;
  • выявление штаммов микроорганизмов, отличающихся фармакологической устойчивостью (нечувствительностью к лекарственным препаратам).

Подготовка к сдаче анализа

Целенаправленно готовиться к сдаче анализа, который будет проводиться методом ПЦР, не требуется. Однако очень важно, чтобы специалист производил забор материала с соблюдением всех необходимых условий стерильности.

Так, например, для взятия крови следует применять специальные вакуумные системы, для взятия секрета половых органов следует использовать специальные пробирки и т.д.

В некоторых случаях в лабораторию материал следует транспортировать. Чтобы это сделать правильно, необходимо герметично закрыть емкость с биологическим материалом. Это позволит предупредить проникновение туда иных микроорганизмов, обитающих во внешней среде.

Расшифровка результата ПЦР

Результаты ПЦР-анализа могут быть двух вариантов:

  • положительный – возбудитель обнаружен;
  • отрицательный – возбудитель не выявлен.

Следует знать — даже при отсутствии клинической симптоматики может быть получен положительный результат.

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Иногда может быть получен сомнительный ответ, когда количество выявленных копий соответствует верхней границе нормы. Чтобы уточнить причину заболевания, следует повторить анализ, уделив особое внимание условиям сбора биологического материала.

Насколько точна ПЦР-диагностика?

Основные преимущества ПЦР-диагностики можно сформулировать в виде нескольких тезисов:

  • возможность получения огромного числа копий патогенных микроорганизмов;
  • большое количество копий – это залог успешного секвенирования (выявления).

Это обеспечивает высокую точность ПЦР-анализа для обнаружения внутриклеточных возбудителей и медленно растущих микроорганизмов.

Поэтому метод особенно информативен для выявления туберкулезных микобактерий и других подобных инфекционных агентов. Он обладает высочайшей точностью и не нуждается в перепроверке полученных результатов (кроме казуистических случаев).

Для получения наиболее достоверных результатов необходимо выполнение двух основных условий, которые предупреждают экзогенное (внешнее) инфицирование:

  • правильный забор материала;
  • правильная транспортировка.

Источник: https://medknsltant.com/pcr-analiz/

Гепатит С количественно: расшифровка анализа ПЦР на вирусную РНК в крови

ПЦР анализ - что это такое, норма, расшифровка

Количественная ПЦР – молекулярно-биологический анализ, при котором подсчитывается количество генетического материала возбудителя в крови. Исследование на гепатит С (количественно) выполняется после подтверждения диагноза для определения вирусной нагрузки. Полимеразная цепная реакция характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью. Поэтому анализ считается золотым стандартом в диагностике гепатита С.

Что такое количественный анализ на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – анализ, который основан на определении участков РНК или ДНК, специфичных для возбудителя инфекции. В качестве исследуемого материала чаще используется венозная кровь. Тест обладает высокой специфичностью, так как при исследовании плазмы выявляется генетический материал конкретного вируса.

Метод полимеразной цепной реакции впервые был запатентован в 1983 году Кэри Мюллисом. Внедрение в клиническую практику молекулярно-биологического анализа совершило переворот в диагностике бактериальных, грибковых и вирусных болезней.

ПЦР количественный при гепатите С – исследование, при котором подсчитывается количество РНК ВГС (HCV RNA). По результатам определяют вирусную нагрузку, от которой зависят:

  1. дозировка медикаментов;
  2. продолжительность противовирусной терапии (ПВТ);
  3. вероятность осложнений;
  4. успешность лечения.

РНК вируса гепатита С (ВГС) обнаруживается спустя 10-12 суток после заражения, когда до первых симптомов еще далеко. Поэтому исследование применяется для ранней диагностики HCV-инфекции.

Когда нужно сдать тест

Молекулярно-биологический анализ назначается при положительном результате скринингового обследования на гепатит – ИФА и качественной ПЦР. Исследование применяется для:

  • определения уровня виремии (вирусной нагрузки);
  • прогнозирования течения болезни;
  • оценки результативности лечения;
  • диспансерного обследования после ПВТ.

ПЦР-диагностика рекомендована всем людям с вирусным гепатитом. Точность исследования варьируется в пределах 97-99%, поэтому риск ложных результатов минимален.

Показания для анализа:

  • обнаружение антител к вирусу гепатита С (anti-HCV);
  • признаки воспаления печени;
  • качественное выявление РНК ВГС;
  • острый и вялотекущий гепатит;
  • микст-гепатиты.

Количественный тест выполняется на всех этапах заболевания. Чтобы оценить результативность терапии, вирусную нагрузку определяют перед, во время и после ПВТ. Если уровень виремии высокий, увеличивается риск цирроза и рака печени. Поэтому для профилактики осложнений назначают антивирусные средства в больших дозах.

Подготовка и сдача крови

Количественный анализ ПЦР проводится в лабораторных условиях. Домашних тестов для выявления числа вирусов в крови не существует.

Объективность результатов зависит от правильности подготовки к исследованию. Чтобы снизить вероятность погрешностей, нужно:

  1. сдавать венозную кровь натощак;
  2. выполнять процедуру до 12 часов дня;
  3. не есть за полсуток до визита в лабораторию;
  4. отказаться от газированных напитков и кофе в день обследования.

Забор крови у женщин рекомендуется выполнять за 1-2 дня до менструации. В этот период иммунная защита ослабевает, поэтому сывороточная концентрация возбудителя максимальная.

За 5-7 суток до анализа исключают алкогольные напитки, жирную и острую пищу. Врачи не советуют курить за 2-3 часа до забора крови.

Точность ПЦР-диагностики на гепатит С во многом зависит от правильности сбора и транспортировки биоматериала:

  • забор крови осуществляют в условиях процедурного кабинета;
  • пользуются только одноразовыми стерильными шприцами;
  • для исключения заражения биоматериала соблюдают правила асептики и антисептики.

Контейнер с пробой маркируют в присутствии пациента, после чего отправляют в лабораторию.

Как выполняют подсчет вирионов

Во время количественной ПЦР возбудителя идентифицируют путем обнаружения РНК в плазме крови. Это возможно за счет удвоения участка нуклеиновой кислоты вируса в среде фермента РНК-полимеразы. Во время анализа копируются (амплифицируются) только определенные участки генома.

Подсчет количества РНК вируса гепатита осуществляют в 3 этапа:

  1. Выделение генетического материала. Чтобы очистить вирусную РНК от крови и белковых включений, биоматериал пропускают через сорбенты, отмывают в растворе, центрифугируют, а потом обезвоживают. В результате остается осадок с вирусными частицами, который растворяют в специальной жидкости. На выходе получается РНК вируса гепатита в элюенте.
  2. Амплификация. Анализ выполняется в приборе-термостате, в котором периодически подогревают и охлаждают пробирки. При одном исследовании делают до 35 циклов, состоящих из 3 фаз: денатурация (разрушение) РНК, отжиг и синтез нуклеиновых кислот матричной цепи. За несколько десятков циклов в пробирке образуется множество фрагментов РНК, достаточное для подсчета количества генетического материала.
  3. Электрофорез. Пробирку с копиями вируса гепатита помещают в агарозный гель. Образец подключают к источнику тока, под действием которого фрагменты РНК разделяются. Благодаря электрофорезу копии нуклеиновых кислот становятся различимыми в свете ультрафиолета. Затем с применением специального оборудования подсчитывают количество РНК вируса.

В настоящее время для определения уровня виремии все чаще проводят ПЦР-диагностику в реальном времени (Real-Time PCR). В отличие от стандартного анализа, в образец крови вводят раствор с флуоресцентными метками. Благодаря этому удается подсчитать количество амплифицированной РНК ВГС в реальном времени после каждого цикла.

Результаты количественного определения РНК

Количественная оценка позволяет судить об уровне виремии, то есть активности вирусного процесса. С учетом результатов анализа гепатолог подбирает дозу лекарства, определяет продолжительность терапии гепатита С.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С:

Данные количественной ПЦР, в МЕ/мл Трактовка
не обнаружено вариант нормы, вируса в крови нет
менее 150 содержание РНК ниже линейного диапазона концентраций, минимальная вирусная нагрузка
150-3*104 низкий уровень виремии
от 3*104 до 8*105 средняя вирусная нагрузка
более 8*105 содержание РНК ВГС выше линейного диапазона концентраций

Вирусная нагрузка – важный показатель, который учитывается при разработке схемы терапии. Если уровень виремии минимальный или низкий, прогноз течения гепатита и результативности ПВТ благоприятный. Ситуация ухудшается при средней и высокой вирусной нагрузке. Такие пациенты подвержены осложнениям – фиброзу, жировому гепатозу, циррозу.

Уровень виремии не отражает степень повреждения печеночной паренхимы или тяжесть течения гепатита. Чтобы определить серьезность изменений в печени, прибегают к инструментальному обследованию – фибросканированию, биопсии и гистологическому анализу.

Сколько по времени делается качественный и количественный анализ и примерная цена

Чтобы провести исследование на гепатит С (качественный и количественный ПЦР-анализ), посетите лабораторное отделение поликлиники, частную клинику или лабораторию. Стоимость диагностики в Москве зависит от:

  1. типа анализируемого биоматериала;
  2. чувствительности применяемой тест-системы;
  3. количества определяемых инфекций.

Примерная стоимость лабораторного анализа

Тип анализа Цена в рублях
забор крови 170-200
качественная ПЦР 750-1000
количественная ПЦР (реал-тайм) 3800-4000
генотипирование 1350-1400

Анализ ПЦР на гепатит С делается не более 3 часов. Забрать окончательные результаты можно уже в течение 1-2 суток.

Бывает ли ложный результат

Генетический материал возбудителя гепатита выявляется в крови спустя 1.5 недели после заражения. До этого периода содержание РНК ВГС в крови так мало, что ее нельзя обнаружить в лабораторных условиях. Для оценки вирусной нагрузки рекомендуется пользоваться высокочувствительными тест-системами: 150-1*108 МЕ/мл.

ПЦР-диагностика – исследование, достоверность результатов которого достигает 97-99%. Искажение данных возможно при:

  1. игнорировании правил подготовки к исследованию;
  2. нарушении требований антисептики;
  3. несоблюдении методики анализа крови;
  4. неправильном заборе и хранении биоматериала.

Перед обследованием пациент должен сообщить врачу о приеме медикаментов, так как их компоненты могут влиять на активность возбудителя и результаты исследования.

ПЦР-диагностика – высокоточное исследование, при котором определяют наличие и количество копий возбудителя инфекции. Получение ложноотрицательных результатов почти невозможно. Погрешности выявляются в единичных случаях при диагностике хронического гепатита вне обострения.

Источник: https://natco24.com/kolichestvennyj-analiz-na-gepatit-s-kak-podgotovitsya-rasshifrovka-norma/

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector